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槲皮素Quercetin对晶状体上皮细胞的保护和毒性作用         
槲皮素Quercetin对晶状体上皮细胞的保护和毒性作用
作者:曹晓光、… 文章来源:北京大学人民医院 点击数:1291 更新时间:2007/5/17 8:15:05
背景和目的 以往研究表明氧化损伤是年龄相关性白内障发生的最根本因素,并发现日常饮食中的抗氧化剂类黄酮(flavonoid)对白内障的发展有明显影响,人类饮食中最重要的类黄酮是槲皮素(Quercetin)。本实验的目的是研究Quercetin对人类晶状体上皮细胞human lens epithelial cells (HLECs)的影响,包括保护和毒性作用。 方法 HLECs预先在完全培养基中孵育24小时,然后在含Quercetin和DMSO (dimethyl sulphoxide)的完全培养基中孵育48小时,Quercetin的终浓度分别为0、0.1、1、10、25、50、100μmol/L,DMSO的终浓度为1% v/v。HLECs活力使用MTT法(3- (4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) colorimetric assay)测量。采用流式细胞仪(flow cytometer,FCM)和TUNEL(terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP - mediated biotin nick end labeling)方法检测细胞凋亡,采用RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction)检测凋亡相关基因Bcl-2、Bcl-xl和Bax mRNA表达水平的变化。 结果 1% v/v DMSO降低HLECs活力,引起细胞凋亡和Bax mRNA表达上调,0.1μmol/L的Quercetin可抑制这些效应,保护HLECs免受DMSO的毒性损伤。同时本实验表明HLECs的活力随着Quercetin孵育浓度的增大而降低,呈剂量依赖性,细胞凋亡的比例与细胞活力的下降非常接近,Bax mRNA的表达也逐步上调。 结论 Quercetin在低浓度(0.1μmol/L)对HLECs具有保护作用,可反转1% v/v DMSO对HLECs的毒性损伤。随着浓度的增加,Quercetin对HLECs产生剂量依赖性毒性作用,引起凋亡基因的表达和HLECs的凋亡,LD50为90.85μmol/L。
会议投稿录入:caoxg    责任编辑:毛进 
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