|
| 抗Ⅳ胶原抗体与金雀异黄素偶联方法的建立及测定 |
|
作者：刘芳 孔君… 文章来源：中国医科大学附属第一医院眼科 110001 点击数：1212 更新时间：2004/6/14 
|
|
| 目的：为药物预防后发障提供了一条新途径，为进一步免疫组化及动物试验打好基础。
方法：采用活性酯法，先把金雀异黄素与活性酯反应，生成金雀异黄素-活性酯结合物，然后将结合物与抗Ⅳ胶原抗体结合，生成抗Ⅳ胶原抗体与金雀异黄素偶联物；用紫外分光光度仪分别测金雀异黄素及抗Ⅳ胶原抗体的紫外吸收峰，做出金雀异黄素的标准曲线。用Comassta亮兰法用牛血清白蛋白作标准曲线；采用透析及SaphpdexG25柱层分离方法分离偶联物，用PBS洗脱，收集2ml/管，共收集40管，各管置UV-1601紫外分光光度计中测OD280及OD264，分别绘制曲线；根据所测偶联物中所含抗体与金雀异黄素的浓度，计算两者的克分子比值。
结果：金雀异黄素在264nm有最大吸收峰，抗Ⅳ胶原抗体在280nm有最大吸收峰；从SaphpdexG25柱层分离纯化后从第5~11管淋洗液同时在280nm和264nm有最大吸收峰，是单抗与金雀异黄素的免疫偶联产物，间接证明单抗与金雀异黄素已结合为同一个分子。各管的OD280及OD264所作的双曲线中，可见两个曲线较为接近，说明偶联效果较佳。金雀异黄素与单抗的克分子比值等于5.2。
结论：活性酯法可成功的将单抗与金雀异黄素偶联，偶联效果良好
|
|
|
| 会议投稿录入：毛进 责任编辑：毛进 |
|
|
上一篇会议投稿： 白内障术后不同用药泪膜早期的动态变化
下一篇会议投稿： 小切口非超声乳化白内障摘除术在“视觉第一中国行动”中的应用 |
|
|
| 【字体：小 大】【发表评论】【加入收藏】【告诉好友】【打印此文】【关闭窗口】 |
|
网友评论：（只显示最新10条。评论内容只代表网友观点，与本站立场无关！）